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复方丹参合剂提高胶原酶活性逆转实验性肝纤维化

更新时间:2000年08月12日00:00:00    作者:战胜乙肝网    文章来源:中华肝脏病杂志
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王爱民 王宝恩 董忠 李新民 任淑清 陈翌阳

  探讨中药复方丹参861合剂对实验性肝纤维化的逆转作用及对胶原酶活性的影响。

  材料与方法

  一、主要仪器及试剂: 14C乙酰化标记的Ⅰ型胶原:Sigma产品。乙酰氨基苯汞(ApMA):Sigma产品二氮杂菲:Sigma公司产品。二、动物及实验分组: 144只清洁级Wistar大鼠(购自卫生部药检所),雌雄各半,体重180~220克,随机分为4组:(1)正常对照组:不制成肝纤维化模型,不予中药灌服。(2)中药对照组:不制成肝纤维化模型,与治疗组同时给中药861合剂,直至实验结束。(3)模型组:按文献制备肝纤维化模型,不予中药灌服。(4)中药治疗组:制备肝纤维化模型,于造模完成后开始给中药861合剂(按1ml/100克体重灌服,每日一次,直至实验结束)治疗3个月。四组动物的实验周期均为6.5个月。三、肝组织及血清标本的留取: 四组动物在白蛋白致敏前,白蛋白致敏后、尾静脉攻击中期、尾静脉攻击后、中药治疗中期(治疗1.5个月时)和中药治疗后(治疗3个月时),每组每次分别宰杀6只,切取肝脏,生理盐水反复灌洗后迅速投入液氮,此后转入-70℃保存待检。血液标本离心后取血清,-70℃保存待检。四、肝组织胶原蛋白含量的测定参照郑的方法。五、肝组织胶原酶活性的测定参照Emonard方法。六、血清胶原酶活性的测定参照Rajabi方法,略有改进。血清中的抑制剂通过对3M的硫氰酸钾(KSCN)透析去除。余同肝组织胶原酶活性的测定方法。九、统计处理方法 应用SAS 6.04版统计分析软件进行统计学处理。结果以x±s表示。组内、组间比较用单因素方差分析。

  结 果

  四组大鼠肝组织活性胶原酶活性(A)、肝组织潜在胶原酶活性(L)、A/L比值及血清胶原酶活性(S)的变化治疗后较治疗中期又有显著降低(P值<0.01)。与模型组相比,中药治疗组治疗中期及治疗后,肝组织胶原蛋白均显著为低( P值均<0.05)。

  讨 论

  曾对861合剂其主药丹参、黄芪及861合剂都分别做了研究,证明丹参、黄芪及861合剂均有抑制Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型胶原合成的作用,从而不同程度地减轻了白蛋白免疫损伤性及四氯化碳中毒性大鼠肝纤维化的发生和发展。然而,使已形成的肝纤维化逆转则不能完全用抑制胶原合成来解释。本实验主要从胶原降解的角度研究了此中药复方逆转肝纤维化的作用。结果表明:对已形成肝纤维化的大鼠予以中药861合剂治疗,可显著提高其肝组织活性胶原酶活性、潜在胶原酶活性及血清胶原酶活性,并可显著提高A/L比值。胶原酶活性升高。增强了对沉积胶原的降解,从而逆转了大鼠的肝纤维化。中药861合剂提高胶原酶活性的机理本实验未能做深入研究,可能与下列因素有关:(1)使胶原酶的生物合成增加。(2)使胶原酶抑制物的生物合成减少。我们以往的研究表明:中药复方861合剂在实验性肝纤维化形成过程中,有抑制转化生长因子(TGFb)mRNA表达的作用。目前已知TGFb可抑制间质胶原酶的基因表达;并可促进金属蛋白酶组织抑制因子1( Tissue inhibitor of metalloproteinase 1, TIMp1)的基因表达。中药对TGFb生物合成的抑制可导致间质胶原酶生物合成的增加和TIMP1生物合成的减少,使胶原酶活性升高。(3)中药861合剂尚有激活胶原酶原的作用。结果表明,中药861合剂可提高肝纤维化大鼠的活性胶原酶活性与潜在胶原酶活性的比值(A/L),可见它可使胶原酶的活化增强。另外它或许也可通过其它细胞因子对胶原酶活性进行调节,对这些尚未澄清的问题还需深入研究。

  中华肝脏病杂志

  ZHONGHUA GANZANGBING ZAZHI

  2000年 第8卷 第1期

Tags:丹参  
责任编辑:战胜乙肝网

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