体液传播是乙型肝炎传播的主要途径、含有乙肝病毒的体液和血液可通过输血及血制品（包括全血、血浆、血清及丙种球蛋白等）、集体预防接种、药物注射和针刺等方式而传播。医院的注射器等消毒不严，甚至做胃镜、肠镜、腹腔镜、胆道镜等内窥镜检查或做介入治疗及各种手术插管均可引起传播。而其中相当一部分人是由于生活密切接触才被传染。有研究表明，病人的唾液、精液和阴道分泌物中均可能含有肝炎病毒，因此不专一的性行为也是引起这类肝炎病毒广泛传播的重要方式。虽然血制品的净化和一次性注射器和针灸针的推广使经注射传播所占的比例有所下降，但由于筛选方法灵敏度的限制以及注射毒品的传播方式不容易在短期内消灭，今后经注射的传播方式将仍占主要地位，生活上的密切接触是次要的传播方式。
乙肝病毒也可经过胎盘或产道传播给婴儿，还可以通过哺乳、喂养等方式传播给婴儿。母婴传播乙肝病毒的比例约占我国婴幼儿HBV感染的1/3。
至于吸血昆虫（如蚊子）传播乙肝病毒虽有可能，但目前缺乏充足的证据。