[Journal of Hepatology]慢性乙肝肝纤维化评估新方法---qFibrosis
细胞外基质（ECM）过量积聚导致组织纤维化，纤维化是慢性肝脏疾病（CLD）的主要特征。在肝脏活检穿刺中，组织纤维化的分期是用半定量评分系统进行评分，具有高度的主观抽样误差与观察差异。胶原蛋白比例面积（CPA）可以用来定量化细胞外基质沉积中胶原蛋白，但其结果高度受到样本大小的影响。
近期发表在著名杂志《Journal of Hepatology》的一项研究发现，以生物组织胶原蛋白87个结构特征参数，应用特殊的原理将这些参数相结合起来而得到的qFibrosis具有高精确性与可重复性，可作为一个新的指标用于定量评估肝纤维化的分期。
研究方法
采集图像来源：TAA(硫代乙酰胺)试剂处理的大鼠肝脏标本，共计25例；肝脏活检确诊的乙型肝炎患者的肝脏标本，共计162例。应用qFibrosis对大鼠标本与临床标本进行实验与检测，用以阐述其可重现性。上述标本全部经Metavir与Ishak半定量评分系统进行评分，评分结果以及胶原蛋白百分比例区域（CPA）作为标准参考与qFibosis（相同标本）的评分结果作对比分析。
图1 阐述qFibrosis确立的原理流程图。
图2 阐述qFibrosis对肝脏活检穿刺样本的纤维化评估。
研究结果
qFibrosis评分结果可精确、可靠地重复Metavir半定量评分系统，以及组织纤维化的评分结果，对大鼠标本（p<0.001）和临床活检样本（p<0.0.05）来说，qFibrosis评分结果可明显地区分组织纤维化损害程度不同分期的差异。
qFibrosis对样本取样大小不同相当敏感，可有效评估纤维化分期（大鼠样本曲线下面积（AUC）: 0.93-0.99；临床活检标本曲线下面积（AUC）: 0.84-0.97:标本长度范围（10mm-44mm）。
qFibrosis能准确地预测以下两种情况标本的纤维化分期：一是长度未达到标准范围值的标本（<15mm），二是不同病理医生（p<0.001）评分结果或高或低的标本。
qFibrosis也能有效地区分Ishake评分系统所确定的5期和6期的之间差异（AUC: 0.73, p=0.008），该差异极可能监测出组织纤维化到肝硬化的转变现象。
图3. qFibrosis与Metavir纤维化评分方法的评分结果高度吻合。（A）TAA纤维化动物模型不同纤维化时期之间的纤维化进展与qFibrosis的变化关系（p<0.001）。
图4. qFibrosis与CPA相比，更好地解决活检穿刺所遇到的相关问题，如样本抽样误差，内部观察者偏差，肝硬化内部变化无法区分等问题。
结论
qFibrosis可提高组织纤维化评分的精确性和效率，可有效地重复、稳定地分析临床研究与实践的抗纤维化治疗效果。本研究最重要意义在于阐述了qFibrosis在纤维化评估的诸多方面都优于CPA方法。
表 3. 对比qFibrosis法 , CPA 法与Ishak 法5和6期的临床特征参数
Data are Mean ± SD.(平均值+标准差)
讨论
qFibrosis设计的理论框架为组织学评分。为全自动概括传统描述评估的大量特点，我们所设计的qFibrosis指标中，围绕病理学普遍感兴趣的三个关键形态学表型，通过测量每个表型位置的小叶内纤维化胶原蛋的空间特征参数，将其定量化，并定义为次级特征指标参数。在组织病理分类的框架中，qFibrosis规定一个连续变量评分方法，该评分方法来源于生物组织本身所固有的全定量化算法分析。因此，qFibrosis具有精确地区分纤维化或肝硬化动态变化（恶化或消退）的可能性。
我们研究的创新点在于通过对纤维胶原蛋白空间特征参数的全定量化定义，根据组织病理学结构特点，确立qFibrosis指标。我们的另一个突出的贡献，是对慢性乙型肝炎样本进行专门算法演练并验证其有效性。因此，可促进qFibrosis方法与特定疾病的临床实践紧密结合。
之前已报道过，CPA法在精密性分期和较低抽样误差上有很大的限制，qFibrosis在此方面，显著地克服了这些限制因素（Figs. 3 和4）。与CPA法相比，qFibrosis设计的策略更加类似于传统组织评估系统。本研究所得到的结果，完全支持我们的假设，即：借助组织病理结构学的特征辅助，qFibrosis可更加有效地区分纤维化不同分期的细微差别，得到更加精准的纤维化评分。
不久的将来，qFibrosis方法在诸多领域中将产生令人瞩目的作用。首先，在慢性乙型肝炎的临床药物研究与管理领域。主要使用慢性乙型肝炎样本进行确立与验证的qFibrosis，很快将作为一个全自动、可靠的肝脏活检穿刺评估的工具。其次，qFibrosis很有可能成为一种肝硬化评估的方法。qFibrosis能区分Ishak 5和6期的不同，qFibrosis可潜在通过不同胶原蛋白形态定量化分类，检测到肝硬化进行性与退行性的组织形态学的改变。最后， qFibrosis也许会更有价值地协助病理医生得到精确、稳定、一致的肝纤维化评分，为没有丰富经验的病理医生提供专业的咨询服务。
同期述评：qFibrosis给予我们什么启示？
法国Tarik Asselah教授等人对这项研究做出精彩点评，以下为详细内容：
Xu等专家在Journal of Hepatogy 杂志上发表的这项研究阐述了肝纤维化评估新方法---qFibrosis。qFibrosis指标可修正由观察者自身偏差引起的抽样误差。对于独立的CHB肝脏活检标本，qFibosis指标可完全忠实地重复Metavir方法所做的纤维化评估，在区分不同分期的纤维化样本中，该指标更优于CPA测定方法。qFibrosis也能有效地区分Ishake评分系统所确定的5和6期的差异，该差异极可能监测到组织纤维化到肝硬化的转变现象。qFibrosis具有高精确性与可重复性，可作为一个新的参数用于定量评估肝纤维化的分期。但是qFibrosis还存在一些问题，比如价格过高，需要花费一定时间等。总之，qFibrosis想得到全世界的认可，还要做近一步的研究。